Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Строят градуировочный график оптических плотностей для 5 стандартных растворов и соответствующих концентраций глюкуроновой кислоты, и определяют концентрации глюкуроновой кислоты в исследуемом растворе для каждого тестируемого объема. Рассчитывают среднюю величину по трем значениям.
2.5.23. СИАЛОВАЯ КИСЛОТА В ПОЛИСАХАРИДНЫХ ВАКЦИНАХ
Исследуемый раствор. Содержимое одного или нескольких контейнеров количественно переносят в мерную колбу соответствующего объема. Чтобы получить раствор с концентрацией полисахарида около 250 мкг/мл, содержимое разводят до необходимого объема водой Р. 4,0 мл этого раствора переносят с
помощью шприца в 10 мл ультрафильтрационную кювету, пропускающую молекулы с относительной молекулярной массой менее 50 000. Дважды промывают шприц водой Р и промывную жидкость тоже переносят в ультрафильтрационную кювету. Проводят ультрафильтрацию, постоянно перемешивая жидкость, в присутствии азота под давлением около 150 кПа. Наполняют кювету водой Р каждый раз, когда объем жидкости в ней уменьшается до 1 мл до тех пор, пока не профильтруется 200 мл, а оставшийся объем в кювете не будет составлять 2 мл. Используя шприц, переносят оставшуюся жидкость в 10 мл мерную колбу. Промывают кювету 3 раза по
2 мл водой Р каждый раз. Смывную жидкость сливают в колбу и доводят объем до 10 мл водой Р (испытуемый раствор). В каждую из двух опытных пробирок вносят 2,0 мл испытуемого раствора.
Стандартные растворы. Используют стандартные растворы, описанные в частной статье.
Готовят 2 серии из 3 пробирок. В пробирки каждой серии помещают 0,5 мл,
1.0 мл и 1,5 мл стандартного раствора, соответствующего типу вакцины, предназначенной для исследования, и корректируют водой Р объем в каждой пробирке до 2-х мл. Готовят контрольную пробу, используя 2,0 мл воды Р в каждой из двух пробирок.
В каждую пробирку добавляют 5,0 мл резорцинового реактива Р. Нагревают при 105° С в течение 15 мин, охлаждают в холодной воде и переносят пробирки на баню с ледяной водой. Во все пробирки добавляют 5 мл спирта изоамилового Р и
тщательно перемешивают. Помещают в емкость с ледяной водой на 15 минут. Центрифугируют пробирки и держат их в емкости с ледяной водой до проведения исследования методом абсорбционной спектрофотометрии. Измеряют оптическую плотность (2.2.25) надосадочной жидкости при длинах волн 580 нм и 450 нм, используя спирт изоамиловый Р в качестве раствора сравнения. Для каждой длины волны рассчитывают оптическую плотность как среднее значений, полученных в двух идентичных растворах. Вычитают среднее значение для контрольного раствора из средних значений, полученных для других растворов.
Строят график, отражающий разницу между оптической плотностью при длинах волн 580 нм и 450 нм стандартных растворов как функцию содержания N-ацетилнейраминовой кислоты и определяют концентрации N-ацетилнейраминовой кислоты (сиаловой кислоты) в исследуемом растворе.
2.5.24. ДИОКСИД УГЛЕРОДА В ГАЗАХ
Диоксид углерода в газах определяется с помощью инфракрасного анализатора (Рисунок 2.5.24.-1).
эь:«?,
ГЛЗп
і
I .Ц LJ.
мії-^тй1- /¦:
11ПУЧСІII1Л
M4L-" ч»
I IhUs'JH
с і цп: ті:
: VDI ID ІІ1Л
І і'- ИНЛь
%\b RFT*';
ції- /спо-і и; м::уч:и я
I**
F =МТ,'ПЯТ:':='
